فعالیت آنزیمی و ویژگی سوبسترایی آنزیم کالیکرین انسانی ۱۳

نویسندگان

علی اوسط ملتی

الفتریاس دیامندیس

چکیده

سابقه و هدف: کالیکرین انسانی13 (hk13) آنزیمی است که توسط ژنhk13 از خانواده کالیکرین کد می شود. مطالعات متعددی وجود hk13 را در مایع منی، مایع آسیتی بیماران با سرطان تخمدان و شیر مادران گزارش کرده اند. در این مطالعه فعالیت آنزیمی و ویژگی سوبسترایی h‏k13 مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها: دی ان آی نوترکیب ویژه آنزیم hk13 در داخل سیستم ژنوم pichia pastoris قرار داده و تکثیر شد. سپس از محلول رویی پس از سانتریفوژ با استفاده از کروماتوگرافی مایع با قدرت سریع آنزیم فوق جدا شده و با استفاده از اولترا فیلتراسیون تغلیظ شد. با استفاده از دستگاه اسپکتروفلورومتر ویکتور سرعت اولیه کاتالیزوری آنزیم تعیین شده و برای تعیین ضریب ثابت میکائیلیس و منتون از نرم افزار کینتیک آنزیمی مدل 1/1 متصل به برنامه گرافی سیگما استفاده شد.یافته ها: دو تری پپتید والینیل ـ پرولینیل ـ آرژینین و فنیل آلانینیل ـ سرینیل ـ آرژینین متصل به 7ـ آمینو 4 ـ متیل کومارین (amc)بسیار سریع تر از سایر سوبستراها توسطhk13 هیدرولیز شدند و میزان ضریب ثابت میکائیلیس و منتون بر ضریب ثابت کاتالیتیکی محاسبه شده برای آن ها، نسبت به سایر سوبستراها بسیار بالاتر بود. آنزیم مذکور به سختی قادر به هیدرولیز پیوندهای پپتیدی از طرف عامل کربوکسیل لیزین بود. میزان ضریب ثابت کاتالیتیکی بر ضریب ثابت میکائیلیس و منتون برای هیدرولیز سوبسترای والینیل ـ پرولینیل ـ آرژینین توسط تریپسین 5/1 برابر هیدرولیز این سوبسترا توسط آنزیم hk13 بود.نتیجه گیری و توصیه ها: تری پپتید والینیل ـ پرولینیل ـ آرژنین متصل به 7 ـ آمینو 4 ـ متیل کومارین بهترین نوع سوبسترا (در بین 6 نوع تری پپتید مختلف) برای این آنزیم است. بنابراین شاید بتوان از افزایش اندک میزانhk13 به عنوان یک شاخص تومور برای کمک به تشخیص بیماری های سرطان (به ویژه سرطان پستان و تخمدان) استفاده نمود. استفاده از تکنیک های پیشرفته آزمایشگاهی جهت ساختن سوبستراهای ویژه hk13 و مرتفع نمودن مهار فعالیت آنزیم در جریان خون توصیه می شود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بررسی اثر جایگزینی فنیل آلانین 17 با آلانین بر فعالیت و ویژگی سوبسترایی آنزیم لیپاز باسیلوی ترموکاتنولاتوس

لیپازها یا تری آسیل گلیسرول هیدرولازها (ec. 3.1.1.3)، آنزیمهایی هستند که در صنایع گوناگون مانند غذا، دارو، تولید شوینده ها، و غیره کاربرد دارند. لیپازهای تولید شده توسط میکروارگانیسم های گرما دوست به دلیل پایداری در دماهای بالا، حلال های آلی و نیز phهای قلیایی, برای استفاده در صنعت مناسبترند. لیپاز btl2 مربوط به باکتری گرما دوست باسیلوس ترموکاتنولاتوس علی رغم این ویژگیهای مطلوب، دارای محدودیتها...

15 صفحه اول

فعالیت پاراکسونازی و آریل استرازی آنزیم پاراکسوناز سرم انسانی در بیماران مبتلا به بیماری عروق کرونر

سابقه و هدف: نظر به اهمیت آنزیم پاراکسوناز سرم (PON1) در جلوگیری از تشکیل LDL اکسید شده و در نتیجه نقش این آنزیم در جلوگیری از ایجاد و پیشرفت آترواسکلروز، در مطالعه حاضر فعالیت‌های پاراکسونازی و آریل استرازی آنزیم PON1 در بیماران مبتلا به بیماری عروق کرونر (CAD) با گرفتگی عروقی متفاوت مورد بررسی قرار گرفت تا تغییر فعالیت آنزیم با پیشرفت آتروم ارزیابی گردد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه 120 بیمار...

متن کامل

بررسی کموانفورماتیکی و اندازه گیری فعالیت آزمایشگاهی لیگاندهای ممانعت کننده آنزیم سیکلواکسیژناز دو Cox2 انسانی

مقدمه: مهار‌کننده‌ های انتخابی آنزیم سیکلو‌اکسیژناز دو، نظیر سلوکو‌کسیب، روفوکوکسیب و والدوکسیب اخیراً به عنوان کاهنده‌ های پاسخ‌ های التهابی به کار می ‌روند، با وجود این هنوز به مطالعات و تحقیقات بیشتری در زمینه مهار‌کننده‌ های انتخابی Cox2 نیاز است. این مطالعه در راستای معرفی ساختار‌های جدید با میل تر‌کیبی بیشتر به آنزیم Cox2 می ‌‌‌باشد. مواد و روش ها: سا‌ختار‌های شیمیا‌یی با 80 درصد شباهت به...

متن کامل

اثر مقادیر مختلف رطوبتی خاک در سطوح مختلف سالیسیلیک اسید بر فعالیت آنزیمی و ویژگی های مورفوفیزیولوژیکی یونجه

به­منظور بررسی اثر مقادیر مختلف رطوبتی خاک در سطوح مختلف سالیسیلیک اسید بر فعالیت آنزیم­ها و ویژگی­های مورفوفیزیولوژیکی یونجه، آزمایشی به­صورت فاکتوریل در قالب طرح بلوک کامل تصادفی با سه تکرار در ایستگاه تحقیقاتی کشاورزی دانشگاه کردستان، در تابستان سال ۱۳۹۲ به­صورت مزرعه­ای طراحی و اجرا شد. عامل اول شامل دو سطح آبیاری نرمال (100 درصد ظرفیت زراعی) و تنش خشکی (50 درصد ظرفیت زراعی) و عامل دوم شامل...

متن کامل

تعیین توزیع فنوتیپ های پلی مورفیسم آنزیم پارااکسوناز سرم انسانی با روش دو سوبسترایی در بیماران مبتلا به استروک ایسکمیک

چکیده: در سال های اخیر مطالعات اپیدمیولوژیکی اندازه گیری فعالیت آنزیم پارااکسوناز علاوه بر ژنوتیپ آن و همچنین ارتباط بین آنزیم پارااکسوناز و بیماری عروقی مورد اهمیت واقع شده است . خانواده ژن پارااکسوناز شامل پارااکسوناز1، پارااکسوناز2 و پارااکسوناز3 می باشد که بر روی بازوی بلند کروموزوم 7 قرار دارند. پارااکسوناز1 مرتبط با hdl است و مانع از اکسیداسیون ldl می شود. پارااکسوناز1 اثر آنتی اکسیدانی...

15 صفحه اول

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی زنجان

جلد ۱۱، شماره ۴۳، صفحات ۱-۹

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023